【拯救科研小白之WB】为什么做WB总是失败？可能是你不太了解目的蛋白！

慧慧子，曾经曝光了无数张片子

被WB森森伤害的科研汪一枚😭

曾经以为做完细胞毒性、检测细胞凋亡

就可以给论文画上完美的句号🙂

谁知道导师突然说你做一下WB验证材料

对JAK-STAT通路的影响吧😦

啪，快乐没了！

今天慧慧子就来给咱们打工人详细的讲述下那些年与Western bolt的爱恨情仇~

Western bolt将待检测的生物大分子经电泳等方法分离后转移并固定在膜上，然后用特异性识别物质（一抗）去识别，最后经显色反应（ECL）在膜上显示出结果即蛋白印迹。

WB的实验步骤

总的来说WB实验比较费时费力且有时会浪费感情

但是WB可以表征的指标也是非常广泛的 

1. 检测样品中特异蛋白是否存在，某种蛋白是否表达

2. 细胞中特异蛋白的半定量检测

（所谓半定量检测就是与内参蛋白做对比求出所占的百分比，故为半定量检测）

3. 蛋白质分子相互作用的研究

（研究通路调节机制）

如果你导师突然想到一个通路或一个蛋白让你去验证，这个时候直接上手做是不是心里没底，在做之前我们需要了解什么呢？

最最最重要的是当然是目的蛋白本尊了

目的蛋白的功能可以让你知道是在做什么，对实验的结果有清晰的预期

除此之外在做的过程中您需要知道蛋白是在哪表达的：比如在什么组织/细胞，在细胞的什么位置表达，只有这样实验才能顺利进行，不至于吭哧吭哧培养了细胞提了蛋白，但是提的蛋白根本不在胞浆表达，结果是浪费了抗体和时间，这就是慧慧子踩过的大坑。

那怎么知道目的蛋白究竟是在哪里表达？

科学指南针不仅可以提供最专业的分析，还能给您完美的蛋白条带😉

再把这样一张蛋白条带放在文章里是不是感觉整个故事更加完整了呢，不再发愁机制研究不知从何说起

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活动内容：蛋白互作、表达差异、目的蛋白验证，WB检测少不了，2021年文章怎么能缺少几个完美的条带 ~

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2020-12-25

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